食品加工および技術ジャーナル

概要

アニオン交換クロマトグラフィーによる市販κ-カゼイングリコマクロペプチドからのフェニルアラニン不純物の選択的除去

中野 剛とオジメック L

スイートホエーに含まれるウシκ-カゼイングリコマクロペプチド（GMP）は、64アミノ酸残基のリン酸化糖ペプチドです。フェニルアラニンなどの芳香族アミノ酸が欠如しているため、GMPはフェニルケトン尿症の患者にとって重要なアミノ酸の食事源であると考えられています。しかし、ヒトの消費のためのフェニルアラニンを含まないGMPの調製に関する情報はほとんどありません。そのため、この研究は、ジエチルアミノエチル（DEAE）-セファセルでのアニオン交換クロマトグラフィーによって、市販の粗GMPからフェニルアラニンを含む不純物を除去するために実施されました。結果は、フェニルアラニンを含むタンパク質またはペプチドはカラムに結合しないが、回収された総シアリン酸の93％を占めるほとんどのGMPはカラムに結合できることを示しました。粗GMPの乾燥重量の平均43％を占める精製GMPには、検出できないレベルのフェニルアラニンが含まれていました。分析とセルロースアセテート電気泳動により、精製された GMP はシアル酸含有量の高い製品であることが判明しました (乾燥重量で平均 15.5%)。Sephacryl S-100 でのゲル濾過クロマトグラフィーと Superdex 75 でのサイズ排除 HPLC により、GMP モノマーが凝集体を形成し、単一のピークとして溶出するという以前の調査結果が確認されました。その溶出量は、二量体 β-ラクトグロブリン (36.6 kDa) の溶出量に近いものでした。DEAE-Sephacel クロマトグラフィーを使用してフェニルアラニン不純物を選択的に除去することで、GMP の粗調製物を高度に精製できるという結論に達しました。