食品加工および技術ジャーナル

概要

逆ミセルを用いたレッドパーチ（Sebastes marinus）の腸からのキモトリプシンの抽出と精製：順方向抽出ステップの最適化

リアン・ゾウ、スザンヌ・M・バッジ、アブデル・E・ガリー、マリアンヌ・S・ブルックス、ディーピカ・デイブ

魚の加工廃棄物は、食品、皮革、化学、臨床産業で応用されているキモトリプシンなどの貴重な副産物を生産するために使用できます。キモトリプシンは、脊椎動物と無脊椎動物の膵臓組織から分泌されるエンドペプチダーゼです。AOT/イソオクタンからなる逆ミセル (RM) システムを使用して、レッドパーチ腸の粗水性抽出物からキモトリプシンを精製しました。フォワード抽出ステップでの pH と AOT 濃度が、総容量 (TV)、容量比 (VR)、タンパク質濃度 (Cp)、酵素活性 (AE)、総活性 (TA)、比活性 (SA)、精製倍数 (PF)、回収率 (RY) に及ぼす影響を調べました。TV は、AOT 濃度の増加と pH の低下とともに減少しました。VR は pH の増加とともにわずかに減少しましたが、AOT 濃度の影響は受けませんでした。 AE、Cp、SA、PF、RYは、pH 7.0およびAOT濃度20 mMのときに最も高くなりました。界面活性剤の量が多いと、安定した油水混合物構造が形成され、逆抽出ステップが困難になりました。pHが6.0から7.0に上昇し、および/またはAOT濃度が1 mMから20 mMに上昇すると、AE、Cp、SA、RYは最初は増加し、その後pHおよび/またはAOT濃度のさらなる上昇とともに減少しました。これらのパラメーターの増加は、pHの上昇によって引き起こされるタンパク質分子表面の正味電荷と逆ミセル内層電荷との間の静電相互作用の増加、およびAOT濃度の増加によって引き起こされる逆ミセル構造の増加によるものです。これらのパラメーターの減少は、タンパク質分子の正味電荷の減少により、キモトリプシンと逆ミセル間の静電相互作用が弱まったことによるものです。 RM 法で得られた AE、TA、SA、PF、RY は、硫酸アンモニウム (AS) 法で得られた値よりも 2.16 ～ 2.82 倍高かった。