生物学的同等性とバイオアベイラビリティのジャーナル

概要

高速液体クロマトグラフィーによるヒト血漿中のビタミンD-2、ビタミンD-3、およびそれらの25-ヒドロキシ代謝物の同時定量

サイド・N・アルヴィ、アハメド・ユスフ、ムハマド・M・ハマミ

ヒト血漿中のビタミンD-2 (VD-2)、ビタミンD-3 (VD-3)、25-ヒドロキシビタミンD-2 [25 (OH) VD-2]、および25-ヒドロキシビタミンD-3 [25(OH) VD-3]を同時に測定するためのシンプルで信頼性の高い高速液体クロマトグラフィー (HPLC) 法が開発され、検証されました。血漿サンプルはメタノールと2-プロパノールの混合物で脱タンパク質化し、ヘキサンで抽出しました。蒸発後、残留物をメタノール:水 (9.6:0.4、v/v) に溶解し、遠心分離し、透明な溶液をZorbax C18カラムに注入しました。移動相 (グラジエント溶出モード) は、メタノール、アセトニトリル、および水 (pH = 3.0) で構成され、溶出液はフォトダイオードアレイ検出器 (波長設定 265 nm) で監視しました。血漿中の VD-2、VD-3、25(OH) VD-2、25(OH) VD-3 の濃度と IS に対するそれらのピーク面積比との関係は、5 - 100 ng/mL の範囲で直線的でした。日間および日内アッセイの変動係数はすべて ≤ 9.7%、バイアス ≤ 13.1% でした。血漿からの VD-2、VD-3、25(OH) VD-2、および 25(OH) VD-3 の平均抽出回収率は、すべて 80% を超えました。この方法は、健康な被験者から得られた血漿中のビタミン D レベルの測定に適用されました。さらに、臨床検査室で遭遇するさまざまな条件下での血漿中の VD-2、VD-3、25(OH) VD-2、および 25(OH) VD-3 の安定性を評価するために使用されました。