生化学と分析生化学

概要

雄羊精子の体外受精能獲得および先体反応中の脂質ラフトのリモデリング

カルメン・コーラス、ロサウラ・ペレス＝ペ、アドリアナ・カサオ、マリオ・オレロ、ルシア・カジェハ、マルガリータ・ガジェゴ、テレサ・ムイーニョ＝ブランコ、ホセ・A・セブリアン＝ペレス

背景: 脂質ラフトは、洗剤耐性ミクロドメイン (DRM) としてよく知られています。私たちは、雄羊の精子表面に 2 つの脂質ラフト マーカー、カベオリン 1 とガングリオシド GM1 が存在すること、また、in vitro 受精能獲得と先体反応がこれらのマーカー分布、DRM と非 DRM 画分のタンパク質含有量と脂質組成に及ぼす影響について初めて報告します。

方法: カベオリン-1 とガングリオシド GM1 は、それぞれ免疫細胞化学と蛍光分析によって証明されました。DRM と非 DRM 画分は、OptiPrepTM 密度勾配によって分離されました。コレステロールは蛍光測定法で、GM1 はペルオキシダーゼ反応で、タンパク質含有量は分光光度法で、脂肪酸プロファイリングはガスクロマトグラフィーで測定されました。

結果：カベオリン-1は59.2±4.3%の新鮮精子の先体で確認され、染色細胞の割合は受精能獲得後に増加した（P<0.05）。GM1はすべての精子の先体後部と尾部で検出され、受精能獲得後に変化は見られなかった。コレステロールとGM1は勾配に沿って分布し、DRM画分にピークがあった。DRM画分には飽和脂肪酸の割合が高い（P<0.001）ことが確認され、不飽和指数と脂質/タンパク質比が高いことからそれが確認された。in vitro受精能獲得により、DRM（P<0.001）画分と非DRM（P<0.01）画分の両方で飽和脂肪酸の含有量が減少した。先体反応後、DRMでは多価不飽和脂肪酸が増加した。すべての処理の結果、DRM (P<0.01) および非 DRM 画分 (P<0.001) のコレステロールおよびタンパク質含有量が低下し、DRM の GM1 含有量が増加しました (P < 0.05)。結論: 脂質ラフト様ミクロドメインは勾配の個別の領域で分離されました。飽和脂肪酸の含有量が高いため、高度に秩序立った環境がもたらされます。その構成は、in vitro 受精能獲得および先体反応中に変化します。
一般的な意義: これらの結果は、雄羊精子 DRM の最初の特性評価であり、精子の受精能獲得メカニズムの理解を深めるのに役立つ可能性があります。