生物学的同等性とバイオアベイラビリティのジャーナル

概要

急速平衡透析（RED）：ヒトおよびラットの血漿を用いた血漿タンパク質結合のin vitroハイスループットスクリーニング技術

ジテンドラ・クマール・シン、アナント・ソランキ、リーマ・C・マニヤル、デバルパ・バナジー、ヴィカス・S・シルサス

分子が血漿タンパク質に結合する程度を決定することは、医薬品開発の重要な段階です。なぜなら、血漿に結合した薬物の量は、化合物の投与量、有効性、クリアランス率、および薬物相互作用の可能性に影響を与えるからです。したがって、血漿中の試験物質の遊離 (%Fu) および結合 (%Bound) 画分の決定は、医薬品の発見および開発のプロセスで日常的に決定される重要なパラメーターです。この決定は、血漿中の非結合薬物画分の信頼性の高い推定のための受け入れられた標準方法である平衡透析によって可能になります。平衡透析は推奨される方法ではありますが、歴史的に労働集約的で時間がかかり、コストがかかり、自動化が困難でした。LC-MS/MS を使用した迅速平衡透析 (RED) 薬物タンパク質結合アッセイは、アッセイ精度が大幅に向上し、速度の利点がある新しい技術を使用して開発されました。予想されるタンパク質結合の範囲をカバーする化合物のパネルが、ヒトおよびラット種の血漿でテストされました。前処理した血漿中の未結合薬物の定量化のために、エレクトロスプレーイオン化と連動した四重タンデム質量分析計を使用した高感度かつ選択的な方法が開発されました。使用した移動相は、アセトニトリル中の 0.1% ギ酸: 水中の 0.1% ギ酸で、グラジエント HPLC 法を採用しました。薬物の未結合画分は、ESI モードで操作した質量分析計で検出しました。さらに、10 個の化合物のデータを文献値と比較しました。説明した方法を使用すると、創薬環境で比較的多数の化合物を PPB についてスクリーニングできます。