生化学と分析生化学

概要

HL60細胞におけるTPAによる単球/マクロファージ様細胞分化は、ヒストンH4リジン16アセチル化の喪失につながる。

ラフル・クマール・ヴェンパティ

12-O-テトラデカノイルホルボール-13-アセテート (TPA) はホルボールエステルであり、HL60 細胞で単球/マクロファージのような細胞分化を誘導します。遺伝子発現のレベルとパターンは、分化した HL60 細胞と未分化 HL60 細胞で大きく異なります。エピジェネティックなヒストン修飾は転写活性化に重要な役割を果たし、修飾レベルの変化は遺伝子発現パターンに大きく影響します。ヒストン H4 リジン 16 (H4K16ac) のアセチル化はそのような修飾の 1 つであり、転写活性化に重要な役割を果たします。生理学的または病理学的影響によるアセチル化レベルの変化は、細胞遺伝子発現に劇的な影響を及ぼします。ここでは、HL60 細胞での H4K16ac レベルに対する TPA 誘導分化の影響を調べる研究が行われました。フローサイトメトリー分析の結果、TPA 分化 HL60 細胞上にマクロファージ細胞表面マーカー CD11b の発現が示され、ウェスタンブロットでは分化細胞における H4K16ac の大幅なダウンレギュレーションが明らかになりました。免疫ブロット法および共免疫沈降アッセイでは、DNA 損傷に依存した H4K16 アセチル化の促進と、未分化細胞における γH2AX との共局在が明らかになりました。一方、TPA 分化細胞 (CD11B+ve) では、DNA 損傷の存在下で H4K16 アセチル化レベルのこのような促進は示されませんでした。本研究では、TPA 誘導による HL60 細胞のマクロファージへの分化が H4K16 アセチル化のダウンレギュレーションにつながることが示されています。