臨床および実験薬理学ジャーナル

概要

ベルチシリンAはアポトーシス誘導により平滑筋肉腫および悪性末梢神経鞘腫瘍の増殖を阻害する

ゼウドゥ A、ロペス G、ブラッジョ D、ケニー C、コンスタンティーノ D、ビッド HK、バッテ K、イウェノフ OH、オバーリーズ NH、ピアース CJ、ストローエッカー AM、レブ D、ポロック RE *

目的:軟部肉腫 (STS) の多様性は、効果的な治療法の開発における大きな課題です。さまざまな病因による 50 を超える組織学的サブタイプから構成される STS サブセットは、核型が単純か複雑かによってさらに特徴付けられます。遺伝的に複雑な STS に関連する遺伝子異常の数が多いため、この STS クラスターに対する効力を示す治療法の開発は特に困難ですが、大いに必要とされています。バーチシリン A は、抗癌作用が実証されている低分子天然物ですが、この薬剤の STS に対する有効性は評価されていません。したがって、この研究の目的は、バーチシリン A を潜在的な STS 治療薬として調査することでした。

方法:悪性末梢神経鞘腫瘍 (MPNST) および平滑筋肉腫 (LMS) という核型が複雑な STS 細胞株の生存率およびコロニー形成能に対するこの薬剤の影響を測定するため、生存 (MTS) およびクローン形成解析を実施しました。アネキシン V/PI フローサイトメトリー解析および蛍光標識切断カスパーゼ 3/7 活性の測定により、アポトーシスに対するバーティシリン A の in vitro 効果を調査しました。細胞周期進行への影響は、ヨウ化プロピジウムのインターカレーションのサイトメトリー測定により評価しました。MPNST 異種移植モデルを使用して in vivo 研究を実施しました。腫瘍を処理し、免疫組織化学 (IHC) を使用してバーティシリン A の増殖 (Ki67) およびアポトーシス (切断カスパーゼ 3) への影響について分析しました。

結果:バーティシリン A 処理により、24 時間後に STS 増殖が減少し、アポトーシスレベルが増加しました。100 nM バーティシリン A は、24 時間後に細胞増殖の顕著な抑制を引き起こしました (LMS1、S462、ST88、SKLMS1、MPNST724 でそれぞれ 96.7、88.7、72.7、57、39.7% 減少)。すべての MPNST および LMS 細胞株で、細胞周期の停止は見られず、アネキシンが増加し、切断されたカスパーゼ 3/7 の活性がほぼ 2 倍に増加しました。対照の正常ヒトシュワン細胞 (HSC) および大動脈平滑筋細胞 (HASMC) は、肉腫細胞株と比較してバーティシリン A 処理に対する耐性が高かったものの、最高処理用量では HSC に毒性が見られました。生体内研究は生体外研究の結果を反映し、11 日目までに、0.25 および 0.5 mg/kg のバーティシリン A を投与した MPNST724 異種移植モデルでは腫瘍サイズが大幅に減少しました。さらに、腫瘍の IHC 評価では、バーティシリン A 投与後に切断カスパーゼ 3 が増加し、増殖 (Ki67) が減少したことが示されました。

結論:核型が複雑な STS の治療の進歩は、これらの疾患に見られる遺伝子異常の多さによって妨げられています。そのため、新しい治療法の特定と調査が強く求められています。私たちのデータは、バーティシリン A がアポトーシスを誘導して MPNST と LMS の増殖を選択的に阻害し、正常細胞には最小限から中程度の影響を及ぼすことを示唆しており、追加の前臨床検証後、バーティシリン A が MPNST と LMS の潜在的な治療薬となる可能性を示しています。