幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

精巣胎児癌における多能性幹細胞の TRA-1-60+、SSEA-4+、POU5F1+、SOX2+、NANOG+ クローン

マレク・マレッキ、ゼニア・トンボカン、マーク・アンダーソン、ラフ・マレッキ、マイケル・ボーシェイン

はじめに: 精巣がんは現在、最も頻度の高い腫瘍であり、15～35 歳の男性の罹患率の主な原因となっています。その発生率は増加しています。胎児性がんは最も悪性の形態で、治療に抵抗性がある場合や治療に抵抗性が生じて再発する場合があります。がん幹細胞がこれらの現象の原因であると考えられています。具体的な目的: この研究の具体的な目的は、患者の生検から直接取得した単一の生きたがん幹細胞のスペクトルを識別および分離し、その多能性を検査することです。患者と方法: 生検は、臨床的および組織学的に原発性の純粋な胎児性精巣がんと診断された患者から採取しました。TRA-1-60 および SSEA-4 を標的とする抗体を生物工学的に作製し、磁性または蛍光性にしました。 TRA-1-60 および SSEA-4 の細胞表面ディスプレイは、多光子蛍光分光法 (MPFS)、フローサイトメトリー(FCM)、免疫ブロッティング (IB)、核磁気共鳴分光法 (NMRS)、全反射 X 線分光法 (TRXFS) によって分析されました。単一の生細胞は、磁気または蛍光選別によって分離され、続いてクローン増殖が行われました。OCT4A、SOX2、および NANOG 遺伝子の転写産物は qRTPCR によって、産物は IB および MPFS によって分析されました。結果: TRA-1-60 および SSEA-4 の強力な表面ディスプレイを持つ細胞のクローンは、精巣の純粋胎児性癌と診断された患者から得られた生検から直接特定され、分離されました。これらの細胞は、多能性遺伝子 OCT4A、SOX2、および NANOG の転写および翻訳のレベルが高いことが示されました。これらは胚様体を形成し、外胚葉、中胚葉、内胚葉に分化しました。結論: 患者から直接採取した精巣の純粋な胚性癌において、多能性幹細胞のクローンを特定し、高い生存率と選択性で分離し、プロファイリングを行いました。これらの結果は、これらの腫瘍の治療抵抗性と再発を説明するだけでなく、標的を絞った個別化治療の設計にも役立つ可能性があります。