幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

脂肪間葉系幹細胞由来細胞外小胞の血管新生能は塩基性線維芽細胞増殖因子によって調節される

タチアナ・ロパティナ、オーロラ・マッゼオ、ステファニア・ブルーノ、チロ・テッタ、ナタリア・カリーニナ、レナート・ロマニョーリ、マウロ・サリッツォーニ、マッシモ・ポルタ、ジョバンニ・カムッシ

目的：本研究の目的は、培養中の脂肪由来間葉系幹細胞（ASC）によって分泌される細胞外小胞（EV）の血管新生特性に対する塩基性線維芽細胞増殖因子（bFGF）の効果を調べることであった。
方法： bFGFあり（FGF-EV）またはbFGFなしで（b-EV）培養したASC（ASC-EV）からEVを単離した。ヒト微小血管内皮細胞（HMEC）に対するEV血管新生作用を、in vitroでは毛細血管様構造形成アッセイにより、in vivoではSCIDマウスへのHMEC含有マトリゲルの皮下注射により比較した。PCRアレイによってEVのマイクロRNA組成を分析し、bFGF刺激後に変化する2つのmi-RNA、miR-223とmiR-21を選択した。我々は、EVの作用を補うために、短いアンチセンス抗miR-223または模倣miR-21をHMECに導入した。
結果： in vitroでは、FGF-EV刺激HMECによって形成された血管様構造の全長と分岐数は、b-EV刺激に比べて有意に減少し、構造はb-EV刺激後よりも有意に大きくなっていた。in vivoでは、FGF-EV刺激HMECによって形成された血管は、b-EV刺激HMECによって形成されたものに比べて数が有意に少なかったが、サイズは有意に大きく、マウス平滑筋アクチン陽性細胞を含んでいた。bFGFは、血管新生因子の発現減少を特徴とするASCEVの分子変化をもたらすことがわかった。さらに、bFGF刺激は、抗血管新生miR-223の発現を上方制御し、血管新生促進miR-21のレベルを低下させた。 FGFEV の効果は、miR-233 の阻害と miR-21 模倣物によって拮抗されました。
結論:結果は、培養条件が ASC 由来の EV の血管新生促進活性を変え、タンパク質と RNA の含有量を変える可能性があることを示しています。特に、bFGF は血管数の増加ではなく、血管の安定化を刺激する EV の生成を誘導します。