微生物および生化学技術ジャーナル

概要

微生物バイオテクノロジー技術を用いたトリコデルマ・ハルジアナムのβ-グルコシダーゼ高生産菌の連続構築

アーメド M. エルボンドクリー、AAM アボショシャ、NH ラドワン、SA ドーラ

β-グルコシダーゼの生産性を向上させるために、優れたTrichoderma harzianum分離株を構築する試みとして、突然変異体の誘導が適用されました。UV 照射とエチルメタンスルホン酸 (EMS) を適用した後、461 の分離株が得られ、そのうち 99 は UV 照射後、362 は EMS 処理後でした。誘導突然変異の 2 番目のステップとして、コルヒチン (0.1% および 0.2%) を投与して処理するために、両酵素の生産性の高さに基づいて 5 つの分離株 (UV 照射後 2 つと EMS 処理後 3 つ) が選択されました。コルヒチン処理後、191 の分離株が得られました。そのうち、野生型株を処理した後には 40 の分離株、2 つの UV 誘導変異体をコルヒチンで処理した後には 70 の分離株、3 つの EMS 誘導変異体をコルヒチンで処理した後には 81 の分離株が得られました。これらの分離株の CMCase および β-グルコシダーゼの生産性をテストしました。1 つの分離株 (D1/4) が 2 つの酵素の最高の生産性であることが判明しました。これは、元の株よりもそれぞれ 160% および 186% 多い CMCase および β-グルコシダーゼを生産したためです。さらに、最高の DNA 含有量と、最高量の CMCase および β-グルコシダーゼは、EMS 処理に続いてコルヒチンを適用した後に得られました。