ファーマシューティカ アナリティカ アクタ

概要

Moniliophthora Perniciosa 由来のシクロフィリンの構造解析とシクロス​​ポリンの真菌の発芽と成長に対する阻害活性

パウロ・S・モンツァーニ、ウンベルト・M・ペレイラ、カリーナ・P・グラマッチョ、ファティマ・C・アルヴィム、フラヴィオ・V・メイレレス、グラウシウス・オリバ、ジュリオ・CM・カスカルド

Moniliophthora perniciosa はカカオ天狗巣病の原因菌です。シクロフィリンは、環境ストレスへの応答、細胞周期制御、カルシウムシグナル伝達の調節、転写制御など、さまざまな細胞プロセスに関係しています。病原性におけるシクロフィリンの関与は、動物と植物の両方に対する病原菌で説明されています。酵母では、カルシニューリンとシクロフィリンは真菌の形態形成と毒性に関与しています。シクロフィリンはシクロスポリン A (CsA) の非存在下でカルシニューリンと相互作用するという証拠があり、CsA の活性がシクロフィリンとカルシニューリン間の調節的相互作用に作用すると提案されています。また、この活性には静真菌作用または殺菌作用が観察されています。ベクター pET28a の子実体の cDNA から M. perniciosa シクロフィリン遺伝子がクローン化され、タンパク質が発現、精製、結晶化されました。アポ型および CsA と結合した型のシクロフィリン構造は、それぞれ 1.85 Ǻ と 1.47 Ǻ で解読されました。異なる生物の構造を比較すると、シクロフィリンの構造は保存されていることが示されています。アポ型と結合型にはわずかな違いが見られました。したがって、シクロフィリン構造はリガンドの存在下で顕著な変化を示さないことになります。しかし、CsA が結合すると、リガンド部位のアミノ酸側鎖と水分子間のさまざまな水素結合が切断されます。CsA を使用した発芽胞子アッセイでは、発芽に対する阻害活性は低いものの、発芽管の成長に対する阻害活性は高いことが示されました。これらの結果は、シクロフィリンが成長プロセスに重要な役割を果たしているが、発芽には重要な役割を果たしていないことを示し、したがってシクロフィリンが M. perniciosa に対する静真菌作用の潜在的なターゲットであることを示唆しています。