ウィリアムズ・フェロ、ロドルフォ・バルデス、エウティミオ・フェルナンデス、ヤリセル・ゲバラ、イェニスリー・メディナ、タチアナ・アルバレス、アンドレス・タマヨ、タチアナ・ゴンサレス、マイラ・ウッド、メイリン・ラ・オ、ヨデルビス・カルボ、デボラ・ギアダ
プロテイン A-セファロース アフィニティー クロマトグラフィーは、医薬品用途の免疫グロブリンの精製に非常に効果的な方法です。ただし、この方法のクロマトグラフィー効率と寿命は、特定のクロマトグラフィー条件 (生物学的ソース、バッファー、流量、抗体特性、温度、タンパク質濃度、洗浄プロトコルなど) に合わせて常に調整する必要があります。この研究では、B 型肝炎ワクチンの有効医薬品成分の精製に使用される CB.Hep-1 モノクローナル抗体 (mAb) の精製に採用されている確立されたアフィニティー クロマトグラフィー手順のパフォーマンスの改善を実証しようとしました。結論として、150 mM PBS、pH 8.0/100 mM クエン酸、pH 3.0 バッファー システム条件で観察された mAb の回収率が比較的低いのは、溶出バッファーがマトリックスと mAb 間の相互作用を完全に遮断できないためでした。この点で、CB.Hep-1 mAb のマトリックスへの保持は、非特異的な相互作用ではなく、マトリックスに結合したリガンドによって促進されました。 1.5M グリシン-NaOH/3M NaCl; pH 9.0/200 mM グリシン-HCl; pH 2.5 緩衝液システムは、100 回の精製サイクルで mAb の純度、分子の均一性、リガンドの漏出、およびマウス DNA 含有量に影響を与えることなく、アフィニティークロマトグラフィーの回収率を大幅に向上させました。したがって、緩衝液システムとして 1.5M グリシン-NaOH/3M NaCl; pH 9.0/200 mM グリシン-HCl; pH 2.5 を適用することで、それぞれ CB.Hep-1 mAb および B 型肝炎ワクチンのコストを削減できました。