現代の化学と応用

概要

蒸発工程なしで血清リバビリン濃度を測定するための短くて堅牢な HPLC-UV 法

アブドゥル・ラフィク・カーン、アリ・アルオタイム、ハリド・ムハメド・カーン、シャジア・ムルタザ、サラ・アルトライフ、ワリード・タミミ、ワカス・ジャミル、イブラヒム・アルトライフ

目的:リバビリン (RBV) の測定は、C 型肝炎患者の治療薬モニタリングにとって重要です。血清サンプル中のリバビリン濃度を蒸発ステップなしで測定するための、シンプルで高速な高速液体クロマトグラフィー (HPLC) 法が開発され、検証されました。

設計と方法:血清サンプル約 500 μl、内部標準 50 μl、20 mM 酢酸アンモニウム緩衝液 (pH=8.5) を 30 秒間混合し、遠心分離しました。上清を、固相抽出用に前処理したフェニルボロン酸カートリッジに移しました。すべてのカートリッジを、10 psi を超えない真空下で 20 mM 酢酸アンモニウム緩衝液 1 mL で 2 回洗浄しました。リバビリンと内部標準は、3% ギ酸 300 μl で溶出しました。100 μl のアリコートを HPLC システムに注入しました。

結果:この方法は、0.05 mg/l を検出限界として 0.1～8.0 mg/l の範囲で直線性を示した。方法比較の相関係数は 0.975、p 値は 0.116 で、結果の再現性が良好であることを示す。平均精度は 3 つの異なる濃度で確認され、3 つのレベルすべてで 107～110% の間であることがわかった。抽出効率は、0.1～8.0 mg/l の範囲のリバビリンで 65.5%、50 mg/l の内部標準で 71.2% であった。アッセイ内精度は 0.5、2.5、5.0 mg/l で測定され、% CV はそれぞれ 2.2%、5.0%、4.5% であることが判明した。3 つのレベルでの注入再現性は 5.5%、6.1%、3.3% であった。重力流と蒸発ステップを排除することで、この方法はリバビリンサンプルの日常的な分析をより迅速かつ容易に行えるようになりました。

結論:新しく開発された HPLC 法は、より高速で、正確かつ感度が高く、当院の C 型肝炎患者の血清リバビリン濃度の測定に適用されました。