石山一貴、小川美香、加藤英史、竹下京介、上田隆三、中山隆之*
背景:ウシ胎児血清 (FBS) は、細胞培養で使用される最も一般的な成長因子です。しかし、細胞療法が拡大するにつれて、適正製造基準に準拠した臨床使用のための異種物質を含まない細胞培養サプリメントの需要が高まっています。ヒト血清は FBS の代替として提案されています。ドナーの数が限られており、医療資源を有効活用する必要があるため、有効期限が切れた新鮮凍結血漿 (FFP) と凍結上清 (CS) から血清を製造し、FBS の代替品としてテストしました。
結果: FFP または CS を生理的レベルのトロンビンおよび塩化アルミニウム (CaCl 2 )とともに 1 時間インキュベートすると、ほぼすべてのフィブリノーゲンが枯渇することがわかりました。FBS とヒト血小板溶解物 (hPL) を用いた比較増殖研究では、FBS と比較して、FFP 血清は 8 つのヒト細胞株 (骨髄由来間葉系間質細胞 (BMSC)、脂肪組織由来間葉系間質細胞 (ADSC)、HeLa、293T、MG-63、HL-60、K562、および Meg-A2 (Saos-2 細胞を除く)) に対して同等またはそれ以上の増殖効果を示しましたが、CS 血清は BMSC、ADSC、および Saos-2 細胞に対してより弱い増殖効果を示しました。 hPL は、FFP 血清や CS 血清よりも BMSC 細胞と ADSC 細胞の増殖をより強力に促進しました。
結論: FFP 血清と CS 血清は、トロンビンと CaCl 2を使用して、血液製剤を節約しながら迅速に生成でき、ヒト細胞の培養において FBS の強力な代替品として機能します。