微生物および生化学技術ジャーナル

概要

ロバスタチンを生産する天然真菌分離株のスクリーニングと分子特性解析

ウペンドラ RS、プラティマ カンデルワル、ZR アミリ、L シュエサ、モハメド アウシム S

Aspergillus sp. はコレステロール低下薬ロバスタチンを生産することが知られています。これまで十分に活用されていなかった天然資源から高収量菌株をスクリーニングする研究は限られています。この目的で、本研究では、インドのカルナタカ州とタミルナドゥ州の内陸部のさまざまな地域からの天然資源（水田の土壌、畑のヒラタケ菌床、堆肥）からさまざまな菌類培養物（130 個）を分離しました。すべての分離株は、形態学的、顕微鏡的方法などの標準的な微生物学的方法によって識別されました。これらの分離株は、液中発酵プロセス（SmF）によるロバスタチン生産のためにさらに培養されました。各分離株からの抽出物は、UV 分光光度計による定量化（200～350 nm）の 3 回の反復にかけられました。代謝産物の生成は、ロバスタチン（バイオコン ラボラトリーズ）を標準として HPLC および減衰全反射（ATR-FTIR）クロマトグラフィーによって確認されました。選択圧を適用することで、ロバスタチンを多く産生する菌株 9 種が選択されました。これらの菌株の液中発酵（SmF）抽出物（ロバスタチン）は、バイオアッセイで Neurospora crassa（MTCC-790）に対して最大阻止帯（≥ 10 mm）を示しました。ロバスタチンの最大収量をもたらす菌株は、ヒラタケ床由来の Aspergillus terreus (SSM4) で、ロバスタチンの最大収量 (996.6 mg/l) を生成し、次いで堆肥源由来の Aspergillus terreus (SSM3) (900 mg/l)、堆肥源由来の Aspergillus flavus (SSM8) (643 mg/l) であることが判明しました。高収量 Aspergillus terreus (SSM4) 分離株は、β2 チューブリン遺伝子配列によって特徴付けられ、MEGA バージョン 5 ソフトウェアを使用した系統発生および分子進化解析によって確認されました。本研究では、天然サンプルから 3 つの高ロバスタチン収量菌株を分離し、最高収量の分離株の 1 つが配列決定され、発行された受入番号 Aspergillus terreus nhceup 11045 で MTCC (IMTECH) Chandigarh に寄託されました。