幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

懸濁液中のmRNA誘導多能性幹細胞からの堅牢で効率的かつ純粋な誘導間葉系幹細胞の生成

ラジニーシュ・ヴェルマ、ポーンパン・センムアン、タナボディ・パユハ、ジュリー・D・メンドーサ、ロツァリン・ナラン、ナパパトソーン・ボンディー、セルゲイ・ドミトリエフス、ポール・マイケル・コリアー

間葉系幹細胞（MSC）は、非常に複雑な疾患に取り組む多くの有望な臨床試験に使用されています。治療に使用される組織由来のMSC細胞集団の純度など、これらの臨床試験の安全性を決定する要因は多数あります。また、注入されたMSCの有効性は、適用前に、増殖能力と連続継代での再現性を通じて、 in vitroでテストする必要があります。さらに、細胞療法と移植を成功させるには、MSCの由来の正しいソースを選択することが重要です。この研究では、非統合（mRNA）方法を使用して、健康なヒトドナーの人工多能性幹細胞（iPSC）（事前に完全な遺伝子検査を実施済み）からiMSCを確実に生成できることを実証しています。この変換方法は、(i) iMatrixを使用せずに懸濁液中のiPSC集団を分化させること、(ii) ステップ(i)で分化した細胞を、馴化MSC培地の存在下で、エピジェネティックメモリの兆候なしに長期間培養してiMSCを生成するのに十分な時間と条件下で継代することを含む。

多能性マーカー発現の分析（Oct-4、SSEA-4、Sox-2、Tra-1-60）は、フローサイトメトリーと蛍光顕微鏡による視覚評価による免疫細胞化学によって確認されました。雄ハムスターへのiMSC集団のin vivo注入では奇形腫は発生せず、iMSCの形質転換純度とiPSCなしの培養における免疫調節特性がそれぞれ確認されました。細胞周期と老化の研究のために、純粋なin vitro iMSCをCD73、90、105発現分析を用いたフローサイトメトリーでテストし、UC-MSCと比較しました。その後、iMSCはUC-MSCと比較して軟骨細胞、骨細胞、脂肪細胞の三分化を示しました。これにより、成人MSCを使用する際の欠点に対処できる可能性があり、さまざまな臨床現場で将来使用するための貴重なツールを提供できます。