生体エネルギー学: オープンアクセス

概要

生存可能な棒状ラット心筋細胞の短期培養に関する推奨事項

ラビア・ジョンソン、フィウェイインコシヴシ・ドルドラ、クリスト・ジョン・フレデリック・ミュラー、ファグリ・フェブラリー、ヨハン・ロウ

単離した成体ラット心筋細胞のin vitro一次培養は、心筋のストレス因子を研究するためのモデルとしてますます人気が高まっています。このモデルは制御された環境で簡単に操作でき、得られた結果から心臓病の病態生理学に関する貴重な洞察を得ることができます。過去数年にわたり、培養中の心筋細胞を維持するのに役立つ堅牢な技術の開発において、いくつかの改良された方法論が説明されてきました。しかし、これらの進歩にもかかわらず、一次心筋細胞の培養は依然として課題となっています。本研究では、生存可能な桿体心筋細胞を単離および培養するためのシンプルでありながら再現性のある方法を紹介します。心筋細胞は、ウシ胎児血清の有無にかかわらず、補充されたMedia 199で維持されました。その生存率はトリパンブルーを使用して評価され、代謝活性はアデノシン5'-三リン酸アッセイを使用して測定されました。本研究で得られた結果は、心筋細胞の収量が低く、その結果として心筋細胞の培養性が低いことに関連する落とし穴を回避するための一般的なガイドラインを提供するために使用されました。ウシ胎児血清の存在下で培養された単離心筋細胞は、培養中 72 時間にわたり、体外の横紋のある桿体形状を維持しましたが、その後、平らになり広がりました。一方、ウシ胎児血清の非存在下で培養された心筋細胞は、最大 120 時間桿体形状を維持しました。