細菌学および寄生虫学ジャーナル

概要

黄色ブドウ球菌ASIA4由来のスタフィロキナーゼ酵素の生産と特性

ヌーラ・ハッサン・アルザラーニ、ファリード・ショーキー・エルシェナウィ*

異なる臨床サンプルから分離された 6 つの臨床的黄色ブドウ球菌株。分離株 ASIA1 および ASIA2 は尿路感染患者の尿サンプルから分離され、ASIA3 はアシュート大学病院の火傷膿瘍患者のスワブサンプルから分離され、ASIA4、ASIA5、ASIA6 は南エジプト癌研究所のさまざまな癌患者の血液サンプルから採取されました。すべての分離株は、血液寒天、加熱血漿寒天、カゼイン寒天、スキムミルク寒天プレート上で、異なる直径の加水分解ハローゾーンを生成する能力が異なり、血餅溶解率も異なりました。黄色ブドウ球菌 ASIA3、ASIA4、ASIA6 は、トリプトン大豆ブロスで 4.83、5.98、2.08 U/mL のスタフィロキナーゼを生成しましたが、カゼイン加水分解酵母エキスブロスではそれぞれ 1.95、2.08、1.70 U/mL に減少しました。一方、Staphylococcus aureus ASIA1、ASIA2、ASIA5 は、生産培地として CYEB 上で 2.20、2.93、3.65 U/mL を示したのに対し、TSB 上では 2.10、1.88、3.41 U/mL を示した。過剰活性生産菌 Staphylococcus aureus ASIA4 から得られるスタフィロキナーゼは、炭素源として 5.0 g のスクロース、窒素源として 10.0 g の大豆、5.0 g の NaCl、5.0 g の K2HPO4、5.0 g の pH 7.0 で構成される最適化された発酵培地に分離株 ASIA4 を接種し、35°C で 24 時間培養したところ、7.64 倍 (2.08 U/mL から 15.88 U/mL) 増加した。さらに、スタフィロキナーゼ活性は、反応時間 25 分、基質としてカゼイン、反応 pH 8.0、反応温度 40°C という最適酵素反応条件でピークに達しました。さらに、温度 15 ～ 45°C、pH 6.0 ～ 9.0 の範囲で 100% の活性を維持しました。EDTA は、その値が 30.0 mM から 90.0 mM に増加するにつれて、酵素活性を 3.0% ～ 32.2% 阻害しました。濃度 30 mM の MgCl2 は酵素活性を 4% 増加させ、その後、より高い濃度ではわずかに減少しましたが、NaCl は 90 mM 未満の濃度で強力なスタフィロキナーゼ活性化剤でした。