微生物および生化学技術ジャーナル

概要

海洋内生菌分離株 Aspergillus sp. ALAA-2000 由来の腫瘍抑制剤 L-グルタミナーゼ生産のプロセス最適化

メルヴァト・モルシー・アッバス・アーメド、タヘル・M・タハ、ナゲ・F・アボ＝ダハブ、ファリード・SM・ハッサン

L-グルタミナーゼは、その潜在的な用途から、最近大きな注目を集めています。海洋軟質海綿動物 Aplysina fistularis から回収されたすべての内生菌は、L-グルタミナーゼを生産することができました。スクリーニング プログラム中、Aspergillus sp. ALAA-2000 は最高の L-グルタミナーゼ生産レベルを示しました。Aspergillus sp. ALAA-2000 による L-グルタミナーゼの生産は、さまざまな発酵モードとパラメーターで評価されました。発酵パラメーターを最適化した後、L-グルタミナーゼ合成の収量が増加しました。固体発酵 (SSF) 下での L-グルタミナーゼ生産 (21.89 U/ml) には、大豆から抽出された 40°C の熱湯が最適な浸出剤でした。最高の L-グルタミナーゼ活性 (91.92 U/ml) は、液中発酵 (SmF) 下での 2 日間の培養後に達成されました。 L-グルタミン、デキストロース、システイン、塩化マグネシウムは、pH 4、27°C の SmF 下で Aspergillus sp. ALAA-2000 による最高の L-グルタミナーゼ生産をサポートしました。L-グルタミナーゼの単一ピークは、硫酸アンモニウム沈殿および DEAE-セルロースカラムクロマトグラフィーによって Aspergillus sp. ALAA-2000 の培養上清から得られ、L-グルタミナーゼ酵素のモノマー特性を示しています。精製された L-グルタミナーゼのパラメータは、次のように最適化されました: pH 10、40°C ～ 50°C で安定、反応時間 30 分、基質濃度 4.38 mg/ml。最大活性化カチオンは Na+ であり、異なる EDTA 濃度は L-グルタミナーゼ活性に影響を与えないため、L-グルタミナーゼ酵素は非金属酵素として表されます。