微生物および生化学技術ジャーナル

概要

バイオナノポア膜とリアルタイムPCRを用いた培養および人工痰中の結核菌検出の予備評価

ジェームズ・V・ロジャースとヤング・W・チェイ

結核菌の迅速な検出と診断は、疾患の重症度、
治療と療法の有効性、公衆衛生モニタリングを評価する上で重要です。この研究では、従来の平板培養法よりも短時間で結核菌を検出し定量するための BioNanoPore 技術 (BNP™ ミドルブルック寒天培地) を評価しました。BNP™ ミドルブルックでは、活発に増殖している培養物や接種した人工痰から 5 日以内に結核菌を視覚的に検出できましたが、ミドルブルック 7H10 寒天培地上ではコロニーは見えませんでした。BNP™ ミドルブルック上で人工痰の有無にかかわらず 19 日間培養した培養物では、液体培養からの結核菌は 5.81～5.86 log10CFU/mL、人工痰では 6.39～6.50 log10CFU/mL でした。液体培養におけるM. tuberculosisの菌数は、Middlebrook 7H10 で 5.70～5.85 log10CFU/mL の範囲でした。BNP™ Middlebrook および Middlebrook 7H10 培地で評価した 19 日培養のすべてのコロニーは、リアルタイム PCR によりMycobacterium挿入配列 (IS) 6110 に対して陽性でした。この研究は、BNP™ Middlebrook が、模擬生物学的マトリックス (人工痰) の有無にかかわらず、標準的なプレーティング技術よりも速くM. tuberculosis を検出できることを実証しています。さらに、BNP™ Middlebrook の発色ステップは、IS 6110 のリアルタイム PCR 検出を妨げません。この研究は、臨床検体評価、治療/ワクチンの有効性、または疫学的監視に関して、生存M. tuberculosis
のより迅速なスクリーニングおよび検出のための BNP™ Middlebrook の潜在的な使用に関する予備評価を提供します。