水産養殖研究開発ジャーナル

概要

パンガスナマズ（Pangasius pangasius）血清グロブリンタンパク質分画のポリペプチドプロファイリングと細菌感染の迅速検出のための抗パンガス血清グロブリン-HRPO免疫複合体の開発

ハレシュ・アディケサバル、プラディプタ・ポール、シッダールタ・N・ジョルダル、ジャワハル・T・アブラハム

細菌性疾患は、商業用ナマズ養殖にとって依然として大きな経済的要因です。したがって、疾患を正しく診断することは、効果的な治療措置を講じ、生産損失を防ぐために重要です。本研究は、塩分画と SDS-PAGE 分析によって、パンガスナマズ Pangasius pangasius の血清グロブリンタンパク質を分画し、特性を明らかにすることを目的としました。分画された P. pangasius の血清グロブリンタンパク質のタンパク質プロファイルには、合計 12 のバンド、すなわち 136.64、120.58、95.87、79.92、72.67、63.04、45.99、43.32、38.65、34.82、28.46、および 19.08 kDa が示されました。抗パンガス血清グロブリン（ASG）ホースラディッシュペルオキシダーゼ（HRPO）免疫複合体（ASGHRPO免疫複合体）は、過ヨウ素酸ナトリウム法に従って調製し、ウサギでそれに対する免疫血清を作製した。ASG-HRPO免疫複合体の血清反応性は、ドットELISAおよび直接ELISAによって評価した。ドットELISAでは、ASG-HRPO免疫複合体をそのまままたは1:10に希釈して使用した場合にのみ、濃い色の斑点の発生が認められた。同様に、直接ELISAの結果は、抗原としてパンガス血清グロブリンタンパク質画分に対して希釈力価<200で低い血清反応性を示した。ドットELISAは、実験的接種によりP. pangasiusにおけるAeromonas hydrophilaおよびEdwardsiella tardaに対する特異的抗体の存在を個別に検出するためにも実施された。どちらの場合も、強い色の斑点の発生が観察され、これは、ASG-HRPO 免疫複合体が P. pangasius 血清中の抗 A. hydrophila 抗体および抗 E. tarda 抗体を検出する際の特異性を示しています。感作した魚の免疫血清を添加して培養すると色の斑点が発生したことから、ASG-HRPO 免疫複合体は、E. tarda および A. hydrophila によって引き起こされる疾患の特異的抗体の血清モニタリングおよび血清診断に使用できることが示唆されました。