母子保健クリニック

概要

デジタルドロップレットPCRと細胞遊離胎児DNAに基づく新しい方法を用いた胎児異数性の非侵襲的出生前検査

ワン・ハイドン、ヤン・ジージエ、ワン・ユーシャン、ジャン・カルロ・ディ・レンツォ、エレナ・ピッキアッシ、フェデリカ・タルキーニ、ジュリアナ・コータ、ワン・ユー、チェン・ユー

背景:一般的な胎児トリソミーの検出に使用されている現在の次世代シーケンシング (NGS) およびマイクロアレイ ベースの非侵襲的出生前検査 (NIPT) は、依然として高価で時間がかかり、集中的な研究室で実行する必要があります。普遍的な出生前スクリーニングとして臨床ルーチン診療における NIPT を改善するために、私たちは、細胞遊離胎児 DNA (cffDNA) を使用して、高い診断精度と低コストの利点を備えた単一の反応で胎児トリソミー 13、18、および 21 を検出する iSAFE NIPT と呼ばれるデジタル ドロップレット PCR (ddPCR) ベースのアッセイを開発しました。

材料と方法:まず人工 DNA サンプルを使用して、iSAFE NIPT の分析感度と特異性を評価しました。次に、iSAFE NIPT の臨床検証のために 269 個の血漿サンプルを分析しました。そのうち 58 個 (21 トリソミー 5 個、18 トリソミー 2 個、13 トリソミー 1 個) は、染色体数の比率に基づいて検査のカットオフ値を確立するために使用されました。残りの 211 個の血漿サンプル (21 トリソミー 10 個) は、iSAFE NIPT の臨床性能を評価するために分析されました。

結果: iSAFE NIPT は、100% の分析感度 (95% CI 94.9-100% トリソミー 21、79.4-100% トリソミー 18、73.5-100% トリソミー 13) および 100% の特異度 (95% CI 96.3-100% トリソミー 21、97.6-100% トリソミー 18、97.6-100% トリソミー 13) を達成しました。また、211 の臨床サンプルでトリソミー 21 の検出に対して 100% の臨床感度および特異度を達成しました (感度の 95% CI は 69.1-100%、特異度の 95% CI は 98.2-100%)。

結論: iSAFE NIPT は、母体血液から胎児トリソミーを検出するための、高度に多重化された ddPCR ベースの検査です。臨床検証に基づき、iSAFE NIPT は高い診断感度と特異性を備えています。通常の臨床検査室で分散化でき、現在の NIPT と比較して高速で使いやすく、経済的です。