幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

成体マウス線維芽細胞から採取したフリーウイルス再プログラム幹細胞由来ドーパミン作動性ニューロンに潜在的な癌リスクは検出されない

劉 G

目的:体細胞の再プログラミングによる幹細胞補充療法は、神経変性疾患および個別化医療の重要な将来的治療法です。ウイルスを運ぶ再プログラミング遺伝子は腫瘍形成のかなりのリスクを与えるため、現在のアプローチではウイルスパターンを非ウイルス系に置き換える傾向があります。しかし、これらの再プログラミング遺伝子の発癌特性については依然として大きな懸念があります。現在、非ウイルス系が再プログラミング後の最終産物におけるゲノム DNA 統合および変異誘発イベントに影響を与えないことを検証できる直接的な証拠はありません。
方法: 4 つの再プログラミング遺伝子を含む独自の非ウイルスベクターを使用して、再プログラムされた幹細胞由来ドーパミン作動性ニューロンの潜在的な癌リスクを評価しました。再プログラムされた幹細胞由来ドーパミン作動性ニューロンは、成体マウス線維芽細胞から 50 日間細胞培養した後の最終産物でした。6 か月間培養した後、これらの細胞の癌リスクを評価しました。
結果:全体的な癌リスク評価は、最初に複数の幹細胞バイオマーカーを使用して調べられました。これらのバイオマーカーの過剰発現は検出されませんでした。さらに、大量細胞培養で 6 か月後に最も重要な神経伝達因子が発現したかどうかを評価しました。結果から、ドーパミン合成の律速酵素であるチロシン水酸化酵素 (TH) の強力な遺伝子発現のみが検出されたことが判明しました。さらに、TH 陽性ドーパミン作動性ニューロンの最終産物は、TH ゲノム DNA の配列決定によって確認されました。データから、4 つの再プログラミング遺伝子のいずれも宿主細胞のゲノム DNA に組み込まれておらず、両端に部分的な非翻訳領域がある 13 個のコーディングエクソン全体に関連する TH ゲノム DNA の遺伝子配列決定後に他の突然変異イベントは発生していないことが示唆されました。
結論:再プログラムされた成体マウス線維芽細胞由来ドーパミン作動性ニューロンは、神経変性疾患の潜在的な治療法として安全な技術およびアプローチであることが証明されました。