微生物および生化学技術ジャーナル

概要

D-アミノ酸の測定のための中/高スループットD-アミノ酸オキシダーゼ比色法。アミノ酸ラセマーゼへの応用

アルマンド・バーンマン、マルセロ・アウベス＝フェレイラ、ニコラス・コートノアン、ナタリー・シャモン、パオラ・ミノプリオ

サンプル中の遊離アミノ酸の検出と定量には、ガスクロマトグラフィー、HPLC、または高度に選択的で感度の高いカラムスイッチング技術など、複雑で強力、かつ通常は高コストで、時には時間のかかる技術が依然として必要です。ここでは、酵素 D-アミノ酸オキシダーゼと化学量論量の過酸化水素の生成に基づいて、溶液中のほとんどの D-アミノ酸を検出および/または定量するための、シンプルなワンステップのマイクロタイタープレート法の開発に着手しました。西洋ワサビペルオキシダーゼと OPD を含めることで、等モル量の L/D アミノ酸標準の連続希釈と比較した反応生成物の吸光度を通じて、D-アミノ酸濃度を測定できます。この方法は、アミノ酸ラセマーゼ活性の中/高スループット分析に簡単に適応できます。