発がんと突然変異誘発のジャーナル

概要

HCT 116 結腸直腸細胞における L-プラスチン発現は NADPH オキシダーゼ依存的に遊走と ROS を増加させる

アイリス・フォラン、マイケル・フリーリー、エイディーン・ロング

目的: L-プラスチンは、通常造血起源の細胞で発現する作用束タンパク質ですが、悪性転換にも関連しています。L-プラスチンの異常発現は大腸がんの腫瘍ステージと相関しており、大腸がん細胞株でのL-プラスチンの異所性発現は増殖と移動を増加させます。L-プラスチンは、さまざまな刺激に反応してSer ⁵で誘導的にリン酸化されますが、大腸がん細胞におけるリン酸化L-プラスチンの役割は明らかにされていません。本研究の目的は、L-プラスチンSer ⁵リン酸化がHCT 116大腸がん細胞の増殖と移動に及ぼす影響を分析することです。

方法:野生型 L-プラスチンまたはセリンがリン酸化されないアラニンに交換された Ser ⁵ L-プラスチン変異体を HCT 116 細胞で発現させた。細胞増殖は細胞数とサイクリン D 活性化によって評価した。細胞移動はトランスウェル移動アッセイを使用して評価した。

結果:野生型 L-プラスチンは HCT 116 細胞で発現すると Ser ⁵が恒常的にリン酸化され、これらの細胞の増殖率の増加を促進することがわかりました。野生型 L-プラスチンを安定的に発現する HCT 116 細胞は、活性酸素種のレベルの増加とともにこれらの細胞の移動能力も増加しました。NADPH オキシダーゼは活性酸素種の主な細胞内発生源であり、薬理学的阻害剤 DPI で NADPH オキシダーゼの活性を阻害すると、これらの細胞の移動が減少しました。興味深いことに、Ser 5 の代わりにリン酸化できないアラニンを持つ L-プラスチン変異体の発現は^{細胞増殖の増加を促進しなかったことから、このプロセスにはリン酸化が必要であることが示されました。対照的に、細胞の移動と ROS 生成は Ser 5}のリン酸化状態とは無関係でした。

結論:これらのデータは、HCT 116 結腸癌細胞における L-プラスチンの発現が、NADPH オキシダーゼに依存し、Ser ⁵リン酸化状態とは無関係に、移動を増加させることを示しています。