幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

ドナーの脂肪由来幹細胞がレシピエントに長期存在することで、げっ歯類モデルにおける血管付き複合組織同種移植の生存率を調節する可能性がある

チェン・チャン、後藤茂、ツァイ・チアチュン、クオ・ユーレン

これまでの研究では、ドナー脂肪由来幹細胞 (ASC) と短期免疫抑制療法を組み合わせることで、げっ歯類後肢モデルにおける血管付き複合組織同種移植(VCA) の生存期間を延長できることが実証されています。本研究では、ドナー ASC のホーミングと移動が VCA の生存期間を調整するかどうかを調べました。雄の Wistar ラットから Lewis ラットへの同所性後肢移植を実施しました (0 日目)。ドナー ASC は脂肪組織から増殖し、緑色蛍光タンパク質 (GFP) トランスジェニック Wistar ラットから継代培養されました。移植を受けたラット（GFP陰性ルイス）は、短期シクロスポリンA（CsA、0～+20日目）、抗リンパ球血清（ALS、0.5 ml ip、-4、+1）、および3回のGFP+-ASC（2×106細胞/回、+1、+7、および+21日目にiv）を含む、以前の設計に類似した免疫抑制プロトコルを受けました。さまざまなドナーおよびレシピエント組織の生着評価は、免疫蛍光染色を使用して実施しました。フローサイトメトリーを使用して、GFP+-ASCを定量化しました。結果から、同種移植生存がASC-ALS-CsAグループでのみ有意に延長（> 100日）し、これはレシピエントにおけるドナーGFP陽性ASCの長期存在とよく相関していることが明らかになりました。フローサイトメトリー分析では、ASC 注入後 2 週間でレシピエントの末梢血に GFP+-ASC が明らかに発現しているものの、移植後に減少していることも明らかになりました。組織生検サンプルで免疫蛍光染色を行ったところ、ASC 注入後 2 週間で同種皮膚とレシピエントの皮膚、肝臓および脾臓実質組織に GFP 陽性細胞が存在することが明らかになりました。しかし、移植後 16 週間では、レシピエントの脾臓実質を除き、レシピエントの組織に GFP+-ASC の明らかな発現は見られませんでした。これは、ドナー ASC がレシピエントの脾臓組織に長期存在し、循環血液が同種移植片の生存期間の延長につながる可能性があることを示唆しています。