微生物および生化学技術ジャーナル

概要

定量的分取連続溶出SDS-PAGE電気泳動による高効率L-アスパラギナーゼの分離と精製

センティル・クマール M とセルヴァム K

新規海洋放線菌由来のユニークな細胞外グルタミナーゼフリー L-アスパラギナーゼが、農業産業廃棄物中に知覚できるほど均一に分離されました。定量的分取連続溶出 SDS PAGE 電気泳動は、生物サンプル中の L-アスパラギナーゼを分取分離するための高解像度の方法です。酵素は 248.68 倍に精製され、最終比活性は 5035.28 IU/mg、収率は 80.71% でした。ホモテトラマー酵素の分子量は 133.25 kDa、等電点はおよそ 5.4 です。Streptomyces radiopugnans MS1 から精製された L-アスパラギナーゼの速度論パラメータ Km および Vmax は、それぞれ 0.0598、3.5478 IU μg - 1 であることがわかりました。ここで紹介する de novo シーケンシング戦略は、Streptomyces radiopugnans MS1 のタンパク質を同定するための迅速かつ信頼性の高い手段を提供します。精製された L-アスパラギナーゼにはグルタミナーゼ活性がないため、抗悪性腫瘍療法の過程で副作用の可能性を減らすことができます。