幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

健康なヒトの椎間板組織からの成人の椎間板幹細胞の分離と特性評価

クリストファー・ダンチ、エリカ・ディラード、ウマル・アクバル

この報告書では、成人のヒト椎間板組織標本から得られた椎間板幹細胞の分離、培養、および特性評価について詳しく説明します。幹細胞の懸濁培養法と生物学を使用して、成人のヒト椎間板幹細胞を分離し、多細胞球状クラスター (円板球) にモノクローナル培養しました。最初の培養シリーズの円板球を収集、処理し、懸濁培養を使用した連続増殖研究のために単一の幹細胞として再プレーティングし、線形増殖が可能であることを実証しました。円板球と成人の椎間板幹細胞を、幹細胞培地でマトリックスコーティングされた培養表面に数時間プレーティングして固定し、幹細胞バイオマーカーを検査しました。円板球と成人の椎間板幹細胞を、軟骨形成培地と培養条件でラミニンコーティングされた培養表面に 14 日間プレーティングして NP 細胞に分化させました。これらの実験で培養された NP 細胞は、NP の形態と表現型、NP バイオマーカーの発現、細胞外マトリックスの分泌、および大容量増殖が可能な連続継代能力を示しました。 「バースト キネティック アッセイ」を使用した組織工学研究により、円板球は、堅牢で組織化された、注目すべき固有の発達および組織工学生物学を備えていることが実証されました。要約すると、成人の椎間板幹細胞と NP 細胞が、健康な脊椎椎間板組織から分離、培養、および特徴付けられました。これらの知見は、変性椎間板疾患 (DDD) の治療に幹細胞ベースの組織工学を使用することについて、調査すべき重要な可能性を示しています。