幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

嗅粘膜のin vitro維持：豊富な嗅粘膜鞘細胞を用いて

ニートゥ・シン、サロイ・C・ゴパール、ラジェシュワル・N・スリヴァスタヴァ、トゥリカ・チャンドラ、サティア・P・アガルワル、サンジェイ・K・シン、デヴェンドラ・K・グプタ、アニル・K・バラピュール

ヒト嗅粘膜（OM）は、ニッチに存在する幹細胞と嗅鞘細胞（OEC）によって媒介される軸索再生と髄鞘形成を通じて嗅覚を制御します。精製されたOEC/嗅覚生検は、さまざまな脊髄損傷（SCI）モデルの機能回復に利用されてきました。しかし、最近の報告では、OM、嗅上皮の基底細胞、嗅外間葉系幹細胞の一次培養が提案されており、これは議論の余地があるとされています。私たちの定義された培養条件は、OECを濃縮することでOMの寿命を延ばし、SCI/蝸牛損傷の修復に使用するための戦略を提供します。簡単に言うと、収集後のOMは非酵素的にスライスされ、6週間培養され、細胞は形態学的、免疫細胞化学的、ウェスタンブロッティングによって特徴付けられました。 21 日目までに、約 70% の GFAP および p75NTR が染色され、紡錘形のアストロサイト様および平坦なシート様の OEC が軸索の再髄鞘化を示しました。30 日目までに、カスパーゼ 3、8、9 (遺伝子産物および活性)、リン酸化 p53 陰性、GFAP および p75NTR 陽性の密集した重なり合った細胞塊が見つかりました。これは、GFAP 染色による 6 週間までに退行性変化を伴っていました。逆に、21 日目にトリプシン処理すると、95% を超える OEC が平坦な形態、GFAP および p75NTR 陽性となりました。ヒト由来の OEC を、F12 培地で 2 週間培養した 2 日 SD ラット嗅球細胞 (GFAP および p75NTR 陽性) と比較しました。したがって、培養された嗅粘膜と培養中の OEC による軸索再生は、SCI/蝸牛損傷の修復研究の手段となります。