概要

混合モードスピンカラムを用いた酸化脂肪酸分析のための高速液体クロマトグラフィーおよび抽出条件の改善

三木貴夫、藤原拓司、岩本了、吉岡剛*、東野健一、仲野亨、沼田義人

液体クロマトグラフィー/質量分析によるリピドミクスは、さまざまな疾患の発症における酸化脂肪酸の役割をより深く理解するために使用されています。ただし、サンプル調製プロセスとシステイニルロイコトリエンのピークテーリングを改善するには、さらなる作業が必要です。この研究では、さまざまな移動相と抽出条件を評価しました。移動相にリン酸を添加すると、システイニルロイコトリエンのピークテーリングが改善されました。抽出条件は、陰イオン交換および逆相特性を持つスピンカラムによっても最適化されました。修正された抽出システムの抽出効率は、62 種類の脂質を使用して調べられ、13 種類の重水素化脂質は、マウス肺ホモゲネートサンプルからのマトリックス効果と回収を評価するために調査されました。ほぼすべての脂質で 70% 以上の抽出効率が得られました。マトリックス効果と回収については、標準偏差 <15% の良好な結果が得られました。最後に、私たちの抽出法の効率をいくつかの従来の方法と比較したところ、私たちの方法を使用することでロイコトリエン C4 の効率が大幅に改善されました。さらに、私たちの方法と従来の方法の分散比は、テストしたすべての脂質で 0.99 を超えました。したがって、この新しく開発された方法は、脂質を分析するための強力なツールとなります。

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