幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

C-Kit+心臓前駆細胞の収量を増加させた新生児ラット心筋細胞の分離法の改良

ジェニファー・ルーテリング、マティアス・イルマー、アレハンドロ・レシオ、マイケル・コールマン、ジョディ・ヴィクーカル、エックハルト・アルト

細胞療法は、工業化社会における主な死亡原因である心臓病の治療における有望な新しいパラダイムです。組織常在性 c-Kit+ 心臓前駆細胞 (CPC) の最近の発見により、これらの細胞を再生介入の治療に利用する科学的取り組みが活発化しており、心筋細胞の初代培養は、心臓の変性と再生の根底にある基本的な分子メカニズムを調査するための一般的な in vitro モデルです。心筋細胞分離の現在のプロトコルでは、細胞収量が低く、線維芽細胞の枯渇が不十分な場合が多く、培養中に心筋細胞が過剰に増殖します。このプロトコルでは、CPC の収量も向上できる、新生児ラット心筋細胞の分離の改良方法について説明します。酵素および機械による組織処理の穏やかな技術により、高い細胞数と生存率を確保し、その後の Percoll 密度勾配遠心分離により線維芽細胞を最小限に抑えます。さまざまな酵素の利点を比較したところ、コラーゲナーゼ 2 のみでは心筋細胞の収量が非常に高くなるのに対し、Matrase™ 酵素ブレンドを適用すると c-Kit+ CPC の相対収量が最大 35% 増加することがわかりました。このプロトコルで分離された心筋細胞と CPC は、心臓病や細胞ベースの治療法を研究するための重要な細胞源となる可能性があります。