植物病理学および微生物学ジャーナル

概要

DNA抽出なしでトマト黄化葉巻ウイルス（TYLCV）を迅速に検出するための免疫捕捉ループ媒介等温増幅

モハマド・アミン・アルマシ、セイエドモハマド・ホッセイニ・デハバディ、ザーラ・エフテカリ

ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）、ループ介在等温増幅（LAMP、主にDNA抽出ステップのため）、DAS-ELISAなどの診断アッセイに必要な時間を最小限に抑えるために、トマト黄化葉巻ウイルス（TYLCV）ゲノムに基づく革新的な免疫捕捉LAMP（IC-LAMP）および免疫捕捉PCR（IC-PCR）プロトコルが使用され、最適化されました。DAS-ELISA、IC-PCR、およびIC-LAMPアッセイは、陽性の感染植物サンプルを正常に検出できましたが、時間、安全性、感度、コスト、DNA抽出の必要性がないこと、および単純さを考慮すると、最後のものが全体的に優れていました。ヒドロキシナフトールブルーは、クロスコンタミネーションのリスクを防ぐため、密閉チューブベースのアプローチで長く安定した色の変化と明るさを生み出すことができます。全体として、IC-LAMPは感度が高く、費用対効果が高く、かなりユーザーフレンドリーであり、以前の診断手順よりも正確な結果を生成できるため、TYLCV認識およびおそらく他のウイルスベースの疾患に関する信頼性の高い代替ウイルス認識システムとしてこのアッセイを提案します。