水産養殖研究開発ジャーナル

概要

Porphyra yezoensis（紅藻綱、ウシノケグサ目）における安定した形質転換システムの開発のための抗生物質の同定と効率的利用

高橋恵、三上康司、水田博之、嵯峨直恒

紅藻類ポルフィラ属における一過性遺伝子発現の開発にもかかわらず、これらの藻類における安定した形質転換システムはまだ確立されていない。形質転換の難しさの理由の1つは、藻類から形質転換細胞を選択する方法がないことである。そこで、安定的に形質転換された細胞を選択するのに適した抗生物質を特定するために、陸上植物や微細藻類の形質転換の選択剤として頻繁に使用される6種類の抗生物質、アンピシリン（Am）、カナマイシン（Km）、ハイグロマイシン（Hm）、ジェネティシン（G418）、クロラムフェニコール（Cm）、パロモマイシン（Pm）に対する配偶体の感受性を試験した。異なる濃度（0～10 mg mL-1）の抗生物質で実施した感受性試験では、Hm、G418、Cm、Pmは1.0 mg mL-1以上で致死効果を示し、これら4つの抗生物質がP. yezoensis配偶体から遺伝子組み換え細胞を選択するのに適していることが示唆されました。一方、P. yezoensis配偶体はAmとKmに対して高い耐性を示しました。人工合成培地を使用してpH値と塩濃度を下げることで、抗生物質濃度を減らすことにも成功しました。改良合成培地で配偶体細胞のHm、G418、Cm、Pmに対する感受性を高めることは、P. yezoensisの遺伝子組み換えシステムの確立に貢献するでしょう。