微生物および生化学技術ジャーナル

概要

液中発酵における農業廃棄物を用いた枯草菌M-9の変異誘発処理によるアルカリプロテアーゼの過剰生産

サディア・ジャベド、ムナザ・メラジ、シャジア・アンウェル・ブハリ、ラオ・イルファン、サクブ・マフムード

グリーンケミストリー技術は、環境廃棄物の課題を管理するための強力なツールです。農業産業残渣は、有用な製品（酵素、有機酸、薬物など）の生産のための微生物の成長をサポートする複雑な多糖類で構成されています。これらの廃棄物の処分と環境に優しい管理は、世界的な優先事項となっています。本研究の目的は、液中発酵で農業産業廃棄物（バナナの茎とトウモロコシの茎）を使用して、親バチルス・サブチリスM-9株をさまざまな変異原UV照射、N-メチル-N-ニトロ-N-ニトロソギニジン（NTG）、エチジウムブロマイド（EB）で処理することにより、アルカリプロテアーゼの収量を向上させることです。振盪フラスコ実験のために、スキムミルク寒天プレートで15の陽性変異体が選択されました。 BSU-5 変異株は、最適化された発酵培地において、親株 (23.57 ± 1.19 PU/mL) よりも高い 81.21 ± 3.24 PU/mL アルカリプロテアーゼ活性を示しました。 pH (9)、温度 (45°C)、接種量 (2 mL)、インキュベーション時間 (24 時間) などの発酵プロファイル、および u (h-1)、Yp/s、Yp/x、Yx/s、qs、Qs、qp などの速度論的パラメーターによっても、BSU-5 変異株から生成されたアルカリプロテアーゼが親株や他の変異株よりもタンパク質分解活性が高いことが確認されました。最後に、BSU-5 変異株をアルギン酸カルシウムビーズと寒天に封入して固定化しました。遊離細胞と固定化細胞の両方で、アルカリプロテアーゼの生産と生体触媒の安定性を調べました。この研究から、固定化細胞は繰り返し使用した場合、遊離細胞よりも酵素生産に効率的であると結論付けられました。