幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

馬間葉系幹細胞の生存および移動能力を最適化するためのガイドライン

サラ・ブルックス、シンシア・デ・フリース、マーク・サルス、デボラ・J・ゲスト、ヤン・H・スパス

背景：間葉系幹細胞（MSC）療法は獣医学で一般的に使用されていますが、最適な細胞の生存と移動を保証するための特定のガイドラインは記載されていません。しかし、これは最適な臨床使用を保証するために不可欠です。方法：本研究では、ウマ末梢血（PB）由来のMSCを分離し、特性評価しました。長期凍結保存に最適なパラメータを決定するために、さまざまなジメチルスルホキシド（DMSO）濃度（5〜20％）と解凍方法（温度制御または手動解凍）がMSC生存率に及ぼす影響を、トリパンブルー染色によって評価しました。その後、速度制御凍結なしで凍結保護剤として10％のDMSOのみを使用して、12か月間MSCの保存を評価しました。次に、頻繁に使用される麻酔薬と注射用ゲルがMSC生存率に及ぼす影響を評価しました。最後に、異なる濃度のヒアルロン酸を介した MSC の移動能力を評価しました。結果: まず、DMSO 濃度と解凍方法は、解凍後 4 時間の評価では MSC の生存率に大きな影響を与えないことが示されました。次に、麻酔薬は細胞毒性が強く、麻酔薬の存在下で 3 時間生存した MSC はわずか 10% でした。ヒアルロン酸およびグリコサミノグリカンベースのゲルは MSC と互換性があり、追跡調査の 48 時間以内で高い細胞生存率 (90% 以上) が得られました。しかし、ポリアクリルアミドゲルでは、約 80% の MSC が 48 時間以内に死滅しました。最後に、ゲルの濃度が MSC の移動能力に影響を与えました。実際、20mg/ml のヒアルロン酸中の MSC のうち、48 時間以内に下層の表面に付着したのはわずか 60% でしたが、同じ物質の 10mg/ml ではほぼ 100% の MSC がゲルを通過して移動することができました。結論: 本研究は、馬 PB 由来 MSC の臨床応用に関する実用的なガイドラインを報告しています。