植物病理学および微生物学ジャーナル

概要

アルファルファ（Medicago varia L.）の国内栽培品種「Burgaltai」の葉のサイズ拡大を目的とした遺伝子組み換え

ウーガンザヤ ミャグマジャブ*、エンクチメグ ヴァンジルドルジ、アルタンツェセグ カジズレン

アルファルファの「ブルガルタイ」栽培品種はモンゴルで最も重要な飼料ですが、過去数十年間、交雑受粉により収穫量は減少しています。この研究は、シロイヌナズナの成長調節因子AtGRF2遺伝子を移入するアグロバクテリウム媒介遺伝子形質転換によって、「ブルガルタイ」栽培品種の葉のサイズを大きくするために実施されました。カルス誘導のために、7 日齢の胚軸と子葉の切片からインビトロ再生が行われました。誘導されたカルスは、シュート誘導と増殖に使用されました。増殖したシュートは、根誘導培地に運ばれました。最良のカルス誘導培地は、2 mg/L 2,4-D、0.2 mg/L BAP、および1 mg/L NAAを添加したMSB5（ムラシゲ・スクーグ培地にガンボルグのビタミンを加えたもの）培地であり、カルスからのシュート誘導および増殖培地は1 mg/L BAP、0.1 mg/L NAAを添加したMSB5培地であり、増殖したシュートは0.5 mg/L NAAを添加した半分の濃度のMSB5培地に根付いた。遺伝子形質転換には、胚軸切片を最初の供給源として使用した。合計235切片を形質転換に対して試験し、30切片（12.7%）がハイグロマイシン抗生物質に耐性であり、植物体を再生した。植物体を土壌に移し、新鮮な若葉をGUS組織化学アッセイおよびRT-PCRに使用して確認した。その中で、完全に再生した 7 つの独立した遺伝子組み換え植物体 (T6、8、11、12、13、15、22) が確認されました。遺伝子組み換えアルファルファの「Burgaltai」品種の葉の大きさは、野生型と比較して 0.7 cm ²増加しました。T6 および 11 系統は、T1 子孫で 3:1 の分離比を示しました (X2=0.04-0.42、p ≤ 0.52-0.84)。