Sivaprasad Y、Bhaskara Reddy BV、Sijitha A、Sai Gopal DVR
ピーナッツ芽壊死ウイルス (PBNV) のコートタンパク質 (CP) に対するポリクローナル抗血清の生産には、in vitro 遺伝子発現戦略が使用されました。ピーナッツ分離株の GBNV CP 遺伝子は、pQE-30UA 発現ベクターにクローン化され、大腸菌 (M15) 細胞に形質転換されました。GBNV の CP 遺伝子の発現は in vitro で誘導され、組み換えタンパク質 (~34 KDa) が精製され、ウサギの免疫化に使用され、GBNV 特異的ポリクローナル抗血清が生産されました。抗血清は、間接酵素結合免疫吸着測定法 (ELISA) で 1:5000 の力価を持ち、ウエスタンブロットで特異的に反応しました。得られた抗血清を使用して、免疫捕捉逆転写ポリメラーゼ連鎖反応 (IC-RT-PCR) アッセイを開発し、GBNV 分離株の検出に対する感度レベルを ELISA と比較しました。組み換え抗血清は、南インドの経済的に重要な作物と雑草宿主におけるGBNVの自然感染を検出することに成功した。