幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

自己血清と抗酸化物質を添加した培地での半自動処理ヒト脂肪由来幹細胞の増殖

リー・イー・スン、ディアン・クン・リー、パオ・ジェン・チェン、ユー・ユー・ジョイス・ホー、ジョン・ソン・クオ、チン・フェン・チェン、クエイ・ファン・リー、ヤオ・ジェン・チャン、チェン・ユン・パン

目的: 切除脂肪組織 (EFT) は、自己細胞療法用の脂肪由来幹細胞 (ADSC) の優れた供給源です。しかし、従来の外科用ハサミで脂肪組織を切除し、ウシ胎児血清 (FBS) を含む培養培地を使用する現在の技術は、適正組織管理基準 (GTP) ガイドラインに準拠していない可能性があります。そこで、少量の EFT から臨床グレードの ADSC を製造するために、上記のガイドラインに準拠した半自動プロセスを開発しました。方法: チューブディスパーサーワークステーションで操作される使い捨てディスパーサーチューブを使用して、EFT から間質血管画分 (SVF) を取得する半自動プロセスを開発しました。ヒト自己血清 (HAS) と、塩基性線維芽細胞増殖因子 (bFGF/FGF-2) および抗酸化物質からなる間葉系幹細胞培養アジュバント (MCA) を添加した培養培地を調製し、in vitro で SVF から ADSC を増殖させました。結果: 半自動プロセスにより、細胞収量が大幅に向上し、組織を細かく刻む作業時間が 1 時間から数分に短縮されました。ADSC の成長は、FBS を添加した培地よりも 10% HAS 培地の方が遅かったものの、MCA を含む 10% HAS 培地 (10% HAS+MCA) での成長はどちらの培地よりも優れていました。10% HAS+MCA 培地は、ADSC の脂肪形成、骨形成、軟骨形成も促進し、CD44、CD73、幹細胞遺伝子の発現も増加させました。結論: 当社の新しい半自動プロセスにより、SVF を効率的に分離でき、10% HAS+MCA 培地により、少量の EFT から分化能力を失うことなく ADSC の成長が促進されます。