臨床および実験薬理学ジャーナル

概要

ヒアルロン酸ナトリウムとインドメタシンをベースとしたナノエマルジョンの内相の関節軟骨初代培養細胞における関節内送達の評価

Guermech I*、Jouan Y、Hay E、Marty C、Cohen-Solal M、Sfar S

本研究では、軟骨マトリックスを分泌する細胞であるマウス関節軟骨細胞におけるヒアルロン酸ナトリウム (HNa) とインドメタシン (Indo) ベースのナノエマルジョン (NE) の内相のインターナリゼーションを調査することを目的にしました。コラーゲン II (Col2a1) とアグリカン (Acan) に対する抗体を用いた免疫蛍光法を使用して、コラーゲン II 型とアグリカンの発現を評価しました。ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) を使用して、(メタロプロテアーゼ 3) Mmp3、(メタロプロテアーゼ 13) Mmp13、Acan、Col2a1、および Sox9 の発現を分析するために RNA を抽出しました。Hyalgan を参照として使用し、各活性物質 (HNa および Indo) の溶液をコントロールとして使用しました。軟骨細胞は数時間で合流し、ナノエマルジョンの内相の 1% が軟骨保護効果を示しました。抗Col II抗体を用いた免疫蛍光法ではコラーゲンの発現が示され、抗アグリカン抗体を用いた免疫蛍光法ではマトリックスプロテオグリカンアグリカンの発現が確認され、軟骨細胞の機能的分化が確認されました。遺伝子発現プロファイルでは、Col2a1およびAcanの発現がナノエマルジョン（1% HNa-Indo）の内部相とともに増加し、Mmp13およびMmp3の発現は24時間後に減少し始め、4日後にはほとんど検出されなくなったことが示されました。これは、細胞が完全に分化して軟骨細胞の表現型を維持し、異化表現型を保護したことを示しています。したがって、当社のナノエマルジョンは、IndoおよびHNaの経皮送達を改善するための潜在的な媒体として使用できます。