ファビアナ・レジーナ・ザビエル・バティスタ、ジュサラ・レーダー、マリア・ベアトリス・プッツィ
臨床応用を目的とした組織修復および再生に適用される皮膚の組織工学には、ヒトケラチノサイトが必要です。細胞増殖を行う際には、短時間で高い細胞濃度が不可欠です。これらの細胞の増殖と維持には通常、成長因子やウシ胎児血清 (FBS) などの動物由来の成分が補充された MCDB 153 培地が使用されます。この研究の目的は、ケラチノサイト増殖用の MCDB 153 培地に基づくさまざまな配合を評価することでした。そのために、24 要因計画を使用して、皮膚細胞培養に重要なサプリメントを定義するためのいくつかの実験が行われました。皮膚サンプルは、形成外科手術であるダーモリペクトミーを受けた同意した 4 人の患者から入手しました 。これらの断片は、0.25% トリプシン-EDTA で 37ºC で 4 時間処理されました。さらに、表皮を真皮から分離して皮膚細胞を提供しました。バッチ培養は、25 cm2フラスコに加えて、6ウェルおよび96ウェルプレートで実施しました。細胞増殖および代謝に関する結果から、ケラチノサイトは、インスリン(7.5 µg/mL)、ウシ下垂体抽出物-BPE(80 µg/mL)、上皮成長因子-EGF(0.08 µg/mL)、ヒドロコルチゾン(0.63 µg/mL)、およびグルタミン(1 gL/L)を含むMCDB 153培地で完全に増殖したことが示されました。一方、実験設計で提案された培地では、満足のいく細胞増殖が得られませんでした。さらに、ほとんどの場合、初期のグルコース濃度は低かったものの、1 gL/Lに達すると細胞によって乳酸が強く生成されました。