遺伝遺伝学: 現在の研究

概要

色覚異常モデルであるCngb3ノックアウトマウスにおけるベクター量を減らしたAAV介在遺伝子治療の評価

Liu X、Zhang Y、Du W、Shi W、Tao Y、Deng W、Li J、Zhao C、Pang J

目的:この研究は、網膜下注射に使用するベクターの量を減らして C57bl/6J マウスの網膜全体にトランスフェクトでき​​るかどうか、またそれが Cngb3 ノックアウト (KO) マウス モデルで錐体機能を回復できるかどうかを調べるために設計されました。
方法: C57bl/6J マウスと Cngb3 KO マウスに、それぞれ 0.5 μL または 1 μL の AAV5-smCBAmCherry ベクターと AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3 ベクターを網膜下注射しました。トランスフェクトされた領域を評価するために、野生型マウスの眼から網膜ホールマウントと凍結切片を調製しました。Cngb3 KO マウスの眼にベクターを注射してから 2 か月後に、暗順応および明順応網膜電図 (ERG) を記録しました。
結果: AAV5-smCBA-mCherry を注射した野生型マウスの網膜では、注射量による違いは認められませんでした。 mCherry陽性網膜色素上皮（RPE）および光受容細胞が網膜全体に観察されました。AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3を注入したCngb3 KOマウスでは、1μLを注入したマウスは0.5μLを注入したマウスよりも明所視ERGの回復の平均が高かった。しかし、1μLを注入したマウスでは暗所視ERGが低く、注入量が多いほど損傷が大きくなることを示しています。
結論：ベクターの量を減らすと（0.5μL）、損傷が少なくなりました。しかし、ベクターの用量を増やすと（1μL）、Cngb3 KOマウスのERG機能がより高くなることがわかりました。