微生物および生化学技術ジャーナル

概要

アスペルギルス フミガタスL-アミノ酸オキシダーゼ - 酵素の 2 段階精製と特性評価

ススミタ・シン、ビノッド・クマール・ゴゴイ、ラジブ・ロチャン・ベズバルア

Aspergillus fumigatus から得られた L-アミノ酸オキシダーゼ (L-aao) をイオン交換クロマトグラフィーおよびゲル濾過クロマトグラフィーで精製しました。イオン交換クロマトグラフィーでの L-aao の収率は 24.40 % でしたが、ゲル濾過による精製 L-aao の回収率は粗酵素の 18.70 % でした。精製酵素の分子量は、SDS PAGE では 55 kDa、ゲル濾過では 93 kDa と推定されました。酵素は 40ºC まで、pH 範囲は 5.6～9.2 と広く安定していました。酵素は、疎水性芳香族 L-アミノ酸、すなわちチロシンとフェニルアラニンに対して高い特異性を持っています。速度論パラメータ Km と Vmax は、それぞれ 43.47 mM と 0.0434 μmol/分/mL と測定されました。 10 mM 安息香酸と EDTA は完全に酵素を阻害しましたが、グリシン (29.56%) と α-ナフトール (12.4%) では最小限の阻害が観察されました。リボフラビン、アジ化ナトリウム、8-ヒドロキシキノリンは、それぞれ最大 44.89%、49.63%、70.07% まで酵素を阻害します。10-4 M と 10-3 M の MgSO4 は、酵素活性をそれぞれ 1.72 倍と 2.22 倍増加させ、10-3 M の CuSO4 は活性を 1.65 倍増加させました。これは、Aspergillus fumigatus からの L-aao の精製に関する最初の報告です。