膜科学技術ジャーナル

概要

ラット網膜細胞におけるタウリン輸送、タウリン濃度およびタウリントランスポーターに対する生体内細胞内亜鉛キレート剤の影響

アサリ・マルケス、メアリー・ウルビナ、マヌエリタ・キンタル、フランシスコ・オブレゴン、ルシメイ・リマ

網膜に高濃度で含まれるタウリンと亜鉛は、中枢神経系に神経栄養効果をもたらす。亜鉛は、in vitro でドーパミンおよびタウリン (TAUT) などの Na+/Cl- 依存性トランスポーターを調節するが、in vivo での亜鉛の効果に関する証拠はない。本研究の目的は、ラット網膜におけるタウリン濃度と輸送、および TAUT の mRNA 濃度に対する亜鉛欠乏の影響を評価することであった。ジメチルスルホキシドに溶解した細胞内亜鉛キレート剤 N,N,N,N-テトラキス-(2-ピリジルメチル) エチレンジアミン (TPEN) のさまざまな濃度を、用量選択のために眼内に投与した: 1、2.5、および 5 nM (最終濃度 12.5、31.25、および 62.5 nM)。眼内での希釈は約 25 倍である。これは、眼の容積 12.5 μl を考慮に入れたものである。網膜は3、5、10日後に解剖された。亜鉛は分光光度計で測定した。5nMのTPEN投与により、5日目に亜鉛が67%減少した。蛍光検出を用いた高速液体クロマトグラフィーで測定したタウリン濃度は、組織では65.96 ± 4.73 nmoles/mgタンパク質、単離細胞では44.34 ± 5.55 nmoles/mgタンパク質、細胞膜では6.63 ± 1.12 nmolesであった。[3H]タウリンを使用したタウリン輸送の能力はTPEN後に38%減少し、親和性は50%増加した。RT-PCRによるTAUTのmRNAレベルは、キレート剤によって50%減少した。網膜のタウリン系の平衡には亜鉛の最適濃度が必要であり、これにはタウリン濃度、タウリン輸送、およびTAUT mRNAレベルが関係している。