概要

一塩基多型に基づくリアルタイムPCRによるブルセラ・アボルタスの鑑別診断

キム・ジヨン、カン・ソンイル、イ・ジンジュ、イ・ギチャン、ソン・ソラ、ジョン・ソクチャン、パク・ヨンホ、ユ・ハン・サン、ムン・ハー

ブルセラ症を効果的に診断するために、PCR に基づく属および種特異的な検出法が数多く開発されている。従来の PCR アッセイとともに、リアルタイム PCR 技術が迅速な診断ツールとして開発されている。その中でも、種間で DNA の相同性が高い細菌には、増幅曲線と融解ピーク分析によって正確な診断が可能なハイブリダイゼーション プローブ (hybprobe) を使用するリアルタイム PCR が推奨されている。B. abortus 用の hybprobe は、fbaA 遺伝子上の特定の一塩基多型 (SNP) から設計された。このプローブは、69°C で融解ピークを示し、約 14 サイクル目から B. abortus の特異的増幅のみを示した。リアルタイム PCR の感度は、10 倍 DNA 希釈で 20 fg/μl であることが明らかになり、臨床サンプルでの検出限界は 4 CFU であった。このリアルタイム PCR は、従来の PCR や Taqman プローブに基づく以前のリアルタイム PCR よりも高い感度を示した。したがって、この新しいリアルタイム PCR アッセイは、B. abortus 感染を迅速かつ正確に区別するのに役立つ可能性があります。

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