微生物および生化学技術ジャーナル

概要

糖尿病II型は貧血と関連がある

ルルジェタ

導入：

この研究の目的は、糖化ヘモグロビン (HbA1c) 誘導体の検査を通じて、糖尿病 II 型患者を追跡することですが、診断、モニタリング、追跡、糖尿病 II 型治療へのアクセスにおける HbA1c 検査中の HPLC 法の重要性についても調査しました。また、糖尿病、糖尿病前症、患者のインスリン挿入、単剤療法の結果も得られましたが、糖尿病患者の異常な HgB 形態 (ヘモグロビン症など) の発見もありました。また、研究中に、HPLC による HbA1c 検査による診断の方向性が、一部の病状では有効であり、他の病状では予防と診断の両方に役立つことがわかりました。この研究は、オリーブ医療および検査診断センターで 1 年以上にわたって行われました。

方法：

HPLC (高速液体クロマトグラフィー) G8 Tosoh は、Keis グループ製薬コソボの独占販売代理店です。国内で初めて、HPLC で HbA1c を実施しました。G8 アナライザーは、迅速かつ正確な HbA1c 結果を提供する Tosoh の次世代の主要 HPLC テスト システムです。アナライザーは、全血検体を溶血および洗浄液で希釈し、処理した検体の少量を TSKgel Glyco HSi バリアント カラムに注入します。分離は、カラム樹脂表面の陽イオン交換基とヘモグロビン成分間のイオン相互作用の違いを利用して、段階的なグラジエント溶出で行われます。ヘモグロビン画分（A1a、A1b、F、LA1c、SA1c、A0、および H-V0、H-V1、H-V2 として指定）は、特定の塩分濃度と pH 濃度を持つ溶出バッファー HSi バリアント 1、2、および 3 を使用して段階的に溶出を行うことにより、カラム材料から除去されます。分離されたヘモグロビン成分は LED フォトメーター フローセルを通過し、そこで 415 nm での吸光度の変化が測定されます。G8 ソフトウェアは生データを統合して縮小し、各ヘモグロビン画分の相対的なパーセンテージを計算します。プリントアウトは数値結果とクロマトグラムで構成されます。これは、各ピーク画分の吸光度と保持時間の変化を表します。分析にはわずか 1.6 分しかかかりません。この研究は 150 人の患者を対象に実施され、そのうち 80% が II 型糖尿病、年齢 40～65 歳、HbA1c が 6.9～11%、HbA が 6～8、HbF が 1% 以上～8% (症例の 48% が HbF 陽性) でした。対照群は、非糖尿病、疑い、脂質異常症、II 型糖尿病の兆候のない患者で、検査の理由はインスリン抵抗性が高い、または中程度であったためで、これらの患者の一部は多嚢胞性卵巣症候群でした。HbA1c を検査する HPLC 法の絶対精度に加えて、この研究では、II 型糖尿病患者の HbF が陽性であることがわかりました。

 

これが貧血につながり、この貧血の原因は、2型糖尿病の合併症である糖尿病性腎症などの腎機能障害であると考えられていますが、先天性の異常なHbFと2型糖尿病との間の未だ不明なメカニズムは、すべての患者でHb電気泳動を検査することができなかったため、関係しないまま残ります。これらの検査結果から、HbFは病理の増加をもたらします。先天性の形態であることに加えて、そのレベルの上昇は、悪性貧血、溶血性貧血、サラセミア、甲状腺中毒症、深部静脈血栓症などの場合にも見られました。糖化Hbの不安定な形態であるLA1cは、カルバミル化Hb（尿素、腎臓病の患者）およびアセチル化Hb（アルコール乱用、肝臓病など）が存在する場合に増加する可能性があり、もちろん血糖値も上昇します。

 血糖値が高い場合、赤血球にブドウ糖分子が付着し、高血糖が長く続くと、より多くのブドウ糖がヘモグロビンに結合し、糖化ヘモグロビンが増加します。そのため、この研究から、LA1c陽性の症例の約35％で、微量アルブミン尿陽性と腎臓専門医の診断によって糖尿病性腎症がすでに始まっていることが確認されました。我が国の HbF 値の異常な形態は、これらの 150 症例では Hb の他の異常な形態は見られなかったため、一方で、HbF 陽性は血清ホモシステインまたは高ホモシステイン血症が軽度または中程度に増加していることと、その 10% が MTHFR 変異陽性であることとの間に相関関係があることを発見しました (検査を受ける機会があったこれらの患者の約 15% で、検査結果では血清ホモシステイン値は 15～17 で、成人の基準範囲は 5～15 μmol/L でした。方法は、ヒト血清中の L-ホモシステイン定量分析装置 (シーメンス) の免疫アッセイ-Imulite-2000 でした)。これらの症例のその他の既往歴データには、一部、脚の浮腫や脚の痛みなどの臨床症状が見られました。したがって、高ホモシステインは、心血管疾患、冠状動脈疾患、初期の動脈硬化性疾患、動脈血栓塞栓症の指標であることがわかっており、このリスクは高コレステロール血症、また遺伝的欠陥としてホモシスチン尿症によっても現れます。

結果：

総ホモシステイン（tHcy）は、心血管疾患の評価における重要な危険因子として浮上しています。tHcyはチオール含有アミノ酸で、細胞内メチオニンの脱メチル化によって生成されます。Hcyは、その後、葉酸依存性酵素メチオニン合成酵素の作用によるメチオニンの再製造、またはB6依存性硫黄転移経路を使用したシステインの再製造に使用するために除去できるプールとして機能します。葉酸とB6依存性は、糖尿病II型と貧血の関連におけるもう1つの原因です。陽性HBFフォームが存在するため、さらに多くの検査が必要となり、血管外科医とのフォローアップ相談が必要になりました。外科医は、2つの変異を伴うMTHFRとその他の止血検査を必要としました。MTHFR変異の結果は、ドイツのSynlab研究所から得られました。これらの症例の11％で、MTHFR変異c677Tが変異陽性でした。

結論：

HPLC は最良の方法であることが証明されているため、ゴールド スタンダード診断方法と呼んで差し支えないという結論に達しました。糖尿病前症のリスクは、HbA1c値が6～6.4%の患者で20%でした。約10%の患者は、初めて検査したHbA1c値が6.5%を超え、糖尿病と見なされました。約25%は、6.6～7%の値で適切にコントロールされていました。また、ADA(米国糖尿病協会の基準)による不適切なコントロールは、HbA1c値が7～8%で、そのうち約45%でした。HBF所見とHbA1c所見からのメカニズムでは、HPLCにより、同じ糖尿病患者が、腎障害、肝障害、貧血、早期動脈硬化、血栓塞栓症、脳卒中リスクなどの糖尿病の合併症の早期診断を受ける可能性があります。