チュンティン・ユエン、カトパガヴァリ・アソカナサン、アレクサンドラ・ダグラス・バーズリー、ケビン・マーキー、ピーター・リグスビー、ドロシー・シン
百日咳ワクチンは世界中の予防接種プログラムで重要な役割を果たしており、ヒスタミン感作試験（HIST）は現在、無細胞百日咳を含む混合ワクチンの公式バッチリリース試験です。HISTはマウス動物試験であるため、アッセイの変動性の問題が大きく、倫理的な問題があります。そのため、3Rに対応して、百日咳毒素（PTx）の2つの機能ドメイン（酵素活性Aプロトマーと炭水化物結合Bオリゴマー）に基づく生化学アッセイシステムが開発されました。PTxの毒性効果に関するこれら2つの生化学テストの臨床的関連性が実証されています。このアッセイシステムの実用性を評価するために、9か国が参加する方法の移転可能性に関する国際共同研究も実施され、このアッセイシステムは管理研究室やワクチン製造施設で容易に採用できることが示されました。このアップデートでは、特定のワクチンの残留 PTx ADP-リボシルトランスフェラーゼと炭水化物結合活性の両方を測定するための、さらに最適化されたアッセイ条件を提供します。一般に、ワクチンを適切に希釈すると、テスト感度が向上します。スパイク実験では、炭水化物結合アッセイで HIST と同様に低レベルの PTx を検出できることが示されました。一部のワクチンでは、ADP-リボシルトランスフェラーゼ活性アッセイでもスパイクの増加に伴う正の傾向が示されましたが、スパイクされたワクチンの多くで得られた値は統計的に有意ではなく、これはスパイクされていないワクチンのベースライン活性が高いためです。この生化学アッセイシステムの試薬はすべて世界中で入手可能で、容易に管理でき、テストの一貫性も良好なため、両方のアッセイを使用して製品の一貫性を監視できます。炭水化物結合アッセイは、無細胞百日咳ワクチンのバッチリリースにおける HIST の潜在的な代替手段としても考えられます。このin vitroアッセイシステムのプロトコルは、補足文書 1 および 2 として提供されています。