細菌学および寄生虫学ジャーナル

概要

外部品質評価による巨大蛭の特異的血清診断のための試験サンプルの開発と試験

ヴー・クアン・ホイ、トラン・ティエン・チュン、ハー・マン・トゥアン、ヴー・チー・タン、レ・ヴァン・チュオン、グエン・ラム・ドック・ヴー、フイン・ティ・ディエム・フック、ブイ・クアン・サン

目的:外部品質評価スキームを介して抗Fasciola gigantica抗体の特異的血清診断用サンプルを作成する手順を構築し、試験サンプルの均質性と安定性を評価すること。

方法:この実験的研究では、ELISA によるスクリーニングで抗Fasciola gigantica抗体を含むサンプルを収集し、その後ウェスタンブロッティングで確認しました。すべてのサンプルを検査した結果、他の蠕虫、特に吸虫抗体は陰性でした。サンプルは、抗 HIV-1 および -2 抗体、抗 HCV 抗体、および HBs 抗原についても陰性でした。サンプルは凍結乾燥法と冷凍法で準備され、安定性と均質性は 2、4、8、12、および最大 24 週間ごとに評価されました。

結果: 3 種類のレベルで抗Fasciola gigantica抗体を含む血清サンプルを 3 ロット作製しました。ロット DK1 の光学密度は OD=0.350 ± 0.037、ロット DK3 および DL3 は O=0.653 ± 0.046、ロット DL1 は波長 450 nm で OD=0.850 ± 0.047 でした。Fasciola gigantica抗原に対する特異的 IgG 抗体は、ウェスタン ブロット法によって 8～9 kDa タンパク質 (P 8～9)、28 kDa (P 28)、および 42 kDa (P 42) の 3 つのタンパク質すべてに対して陽性であることがわかりました。試験サンプルは、フィッシャー検定 (F 統計値 0.05) によって均質であること、および 24 週間安定していること (t 統計値 0.05) が確認されました。

結論:外部品質評価による抗Fasciola gigantica抗体の特異的血清診断用の試験サンプルは、凍結乾燥法と冷凍法によって均質性と安定性を保ちながら 24 週間持続して製造できます。