心臓血管薬理学: オープンアクセス

概要

培養皿から剥離したヒト臍帯静脈内皮細胞を対照細胞として用いた炎症性循環内皮細胞の検出

栃窪淳平、松田直之、太田好美、東智子、高谷雄大、稲葉正人、安達祐史、椎谷紀彦

背景：全身性炎症反応症候群（SIRS）を伴う播種性血管内凝固症候群（DIC）は、重篤な患者における重篤な疾患であり、血管内皮障害の進行と密接に関連している。臓器機能障害の進行を防ぐためには早期診断が必要である。循環内皮細胞（CEC）は血管内皮障害で増加し、DIC診断に重要な役割を果たす可能性がある。しかし、CECの検出方法は標準化されていない。本研究は、集中治療室でのCEC検出方法を確立することを目的とした。腫瘍壊死因子アルファ（TNF-α）によって培養皿から剥離したヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）をCECの対照細胞として使用した。
方法：培養HUVECをTNF-α（100 ng/mL）を含む培地でインキュベートし、24時間後に培養皿から剥離した細胞をTNF-HUVECとして使用した。フローサイトメトリー（FC）を用いて正常HUVEC、TNF-HUVEC、および血液細胞の細胞表面分子を分析し、CECを検出するための適切なマーカーを探した。正常HUVECとTNF-HUVECを血液に加え、FCと免疫ビーズ法（IB）を使用して検出し、2つの方法を比較した。FCを使用して、健康なボランティアと集中治療室（ICU）患者のCECを測定した。
結果： CD146とCD105はHUVECで高度に発現しており、全血細胞からのUVECの分離に優れていた。正常HUVECの平均検出率は、FCで75％、IBで82％であった。しかし、TNF-HUVECの平均検出率は、FCで64％、IBで27％であった（p < 0.05）。20人の健康なボランティアと16人のICU患者の平均CEC数は、それぞれ2.8細胞/mLと4.3細胞/mLであった。 SIRS 誘発性 DIC を患う 1 人の ICU 患者では、CEC が 49 個/mL 増加しました。
結論: CD146 と CD105 は、血液から内皮細胞を検出するのに適しています。重度の炎症状態における内皮細胞の検出には、IB よりも FC の方が優れています。