幹細胞研究と治療のジャーナル

概要

凍結保存は長期増殖した脂肪由来幹細胞の細胞機能に影響を与える

アリ・エル・オスマニ、サブリナ・ロウアム、アナス・アバド、チャイマー・エラーウイ、サラ・ハリバ、ハッサン・ブーキンド、ジャラル・ヌリル、ガブリエル・マルカ、ルブナ・マジニ

目的:脂肪由来幹細胞 (ADSC) は免疫原性が低く、異質なサイトカイン分泌プロファイルを持つため、細胞ベースの免疫療法の候補としてより適しています。ADSC によって分泌されるインターロイキン-6 (IL-6) と Toll 様受容体 2 (TLR2) は、生来的または刺激を受けた場合でも、調節され、さまざまな炎症性因子の分泌を通じてさまざまな炎症メカニズム経路につながります。これらの特性は、炎症関連の慢性疾患の治療に非常に役立ちます。使用するには、移植または凍結保存の前に、体外での ADSC の増殖が重要な問題です。培養増殖中に機能的な細胞変化が報告されており、凍結/解凍の影響と相互作用しやすく、細胞治療の結果に疑問が生じています。この研究の目的は、増殖培養のさまざまな時点での凍結/解凍が IL-6 および TLR2 分泌に及ぼす影響を特定することです。
方法: ADSC は若い女性ドナーから採取され、培養され、継代ごとに 6 か月から 1 年間、ウシ胎児血清 (FBS) とジメチルスルホキシド (DMSO) で凍結保存されました。その後、ADSC は、凍結保存前 (新鮮) と解凍後、コンフルエンスまで培養 (凍結/解凍) して増殖、クローン形成性、サイトカイン遺伝子発現、評価について検査されました。継代 0 (P0) で保存された ADSC は、P1 でコンフルエンスした後に解凍され、検査されました。
結果: P1 として凍結保存された ADSC は、新鮮なものと比較してクローン形成性、総 RNA、タンパク質分泌が増加しました。 IL-6、IL-10、腫瘍壊死因子（TNF）-α、TLR2の相対定量（RQ）およびサイトカイン評価により、長期増殖および凍結保存されたADSCでTLR2の中程度のアップレギュレーションが明らかになった一方、有意に高いIL-6分泌レベルが観察されました。
結論：私たちの結果は、培養で長期増殖された凍結保存ADSCは機能的に異なり、IL-6およびTLR2活性化による炎症反応の調節を通じて免疫抑制特性が損なわれた可能性があることを示唆しました。