微生物および生化学技術ジャーナル

概要

組み換え大腸菌JM109/LBH-10の構築とカルボキシメチルセルラーゼ生産の最適条件の野生型Psychrobacter aquimaris LBH--10との比較

Sang-Un Lee、Wa Gao、Chung-Han Chung、Jin Woo Lee

好冷性海洋細菌Psychrobacter aquimaris LBH-10のカルボキシメチルセルラーゼ（CMCase）をコードする遺伝子を大腸菌JMB109にクローニングした。大腸菌JM109/LBH-10の細胞増殖に最適な米ぬか、塩化アンモニウム、培地の初期pHの条件はそれぞれ73.4 g/L、5.8 g/L、6.5であったのに対し、CMCaseの生産にはそれぞれ57.1 g/L、6.4 g/L、6.7であった。大腸菌JM109/LBH-10による細胞増殖とCMCaseの生産に最適な温度はそれぞれ40°Cと35°Cであることが判明した。細胞増殖と CMCase の生産に最適な 7 L バイオリアクターの撹拌速度と通気率は、480 rpm と 1.0 vvm でした。この研究では、E. coli JM109/LBH-10 による細胞増殖と CMCase の生産に最適な条件が、その野生型である P. aquimaris LBH-10 の場合とは異なることがわかりました。E. coli JM109/LBH-10 による CMCase の最大生産量は 576.8 U/mL で、P. aquimaris LBH-10 による生産量の 1.80 倍でした。